液相色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。
液相色譜柱在使用過程中易出現(xiàn)的問題和解決辦法
在使用中常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正常現(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外),可能的原因有如下幾點:
(1)柱頭的過濾篩板堵塞或污染;
(2)柱頭的填料被樣品污染;
(3)柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結(jié)晶析出;
(4)流動相pH值過大或過小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。
解決辦法如下:
(1)如確定是液相色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下柱頭,將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入。
(2)如確定柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。
(3)如確定定是鹽結(jié)晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。
(4)如果因pH值使用不當,很難恢復。