熱原(Pyrogen)泛指能引起哺乳類(lèi)動(dòng)物發(fā)燒反應(yīng)的物質(zhì),種類(lèi)很多,其中主要的是內(nèi)毒素(Endotoxin)。內(nèi)毒素是一種脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS),是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上*的結(jié)構(gòu),細(xì)菌死亡或分解后被釋放出來(lái)。生物制品中內(nèi)毒素的去除一直是一項(xiàng)十分重要的工作。親和層析具有高度的選擇性,是去除內(nèi)毒素的一種Z為理想的方法。
凈化原理
月旭去除內(nèi)毒素親和介質(zhì)Endotoxin rem Tanrose 4FF以自制的瓊脂糖凝膠為基質(zhì),以多粘菌素B為配基,產(chǎn)品具有很好的化學(xué)、物理穩(wěn)定性和良好的生物相容性, 配基穩(wěn)定、可以重復(fù)使用,但多粘菌素B只對(duì)部分內(nèi)毒素有抑制作用,因此可用于去除溶液中的部分內(nèi)毒素。
去除內(nèi)毒素親和介質(zhì)除了采用常規(guī)的柱層析方法去除內(nèi)毒素外,還可采用靜態(tài)吸附的方法進(jìn)行內(nèi)毒素去除。靜態(tài)吸附的方法可直接將親和介質(zhì)加入到樣品中,不必裝柱,使用方便,去除效率高,容易放大。
產(chǎn)品性能
產(chǎn)品名稱(chēng):Endotoxin rem Tanrose 4FF;
基質(zhì):4%高度交聯(lián)的瓊脂糖微球;
功能基團(tuán):多粘菌素B;
粒徑:45-165μm;
載量:5000-10000EU/ml;
PH穩(wěn)定范圍:3-10(短期),3-11(長(zhǎng)期);
儲(chǔ)存溫度:4-8℃;
保存液:20%乙醇。
親和層析填料使用注意事項(xiàng)
① 該去內(nèi)毒素親和填料每次使用前都需要用緩沖液1處理。
(緩沖液1組成:1%脫氧膽酸鈉,20mM磷酸鹽緩沖液,pH7.0。
配制:稱(chēng)取Na2HPO4.12H2O 2.43g,NaH2PO4.2H2O 0.25g,NaCl 4.5g,脫氧膽酸鈉5.0g,加注射用水溶解并定容到500ml)。
② 配置緩沖液過(guò)程要防止引入內(nèi)毒素,ZH好使用注射級(jí)用水。
③ 適當(dāng)延長(zhǎng)填料和樣品的處理時(shí)間可加大內(nèi)毒素的吸附量。
④ 如果用磁力攪拌要注意不能轉(zhuǎn)速太快,防止攪碎填料。
⑤ 如果樣品本身帶負(fù)電荷,樣品中可入<0.2MNaCl,可增加樣品回收率。
⑥ 樣品PH范圍在7-9之間。
⑦ 在不超過(guò)填料處理量的情況下,如果一次去除不*,可以重復(fù),直到合格為止。
⑧ 親和填料Endotoxin rem Tanrose 4FF的保存條件為20%乙醇,4-8℃。