上樣量的定義

在制備純化中，上樣量可以細(xì)化為兩類：理論最大上樣量和有效最大上樣量。

理論最大上樣量指的是不考慮任何分離因素的影響，僅僅考慮填料對(duì)樣品的承受能力。對(duì)于不同種類的色譜填料，因?yàn)榛|(zhì)不同，鍵合相不同，分離作用原理不同，造成單位重量的填料對(duì)樣品的分離能力也有所差異。例如最常見的裸硅膠填料和C18硅膠填料，鍵合相分別是硅醇基團(tuán)和C18。通常裸硅膠的理論最大上樣量是硅膠量的1/10， C18硅膠填料的理論最大上樣量是填料量的1/50。

而在實(shí)際使用中，樣品的分離度，樣品的溶解度都會(huì)影響我們上樣情況。因此實(shí)際上我們?cè)谌粘Ｖ刑岬降姆蛛x度更多指的是有效最大上樣量。

分離度和溶解度對(duì)上樣量的影響主要決定是否要超載進(jìn)樣和超載進(jìn)樣的方式。

首先是分離度，當(dāng)目標(biāo)物和雜質(zhì)分離度很高，可以加大進(jìn)樣量。隨著進(jìn)樣量的加大，分離度變小，直到會(huì)影響到分離純化收率和純度要求。如果分離度不好就降低上樣量。因此分離度決定是否要采取超載進(jìn)樣。

其次是溶解度，它決定了超載進(jìn)樣的方式。樣品溶解性好，則首xuan濃度超載。進(jìn)樣體積不變，增加樣品濃度，樣品峰從對(duì)稱高斯峰形轉(zhuǎn)變成三角形，峰展寬較小，分離效果好。樣品溶解性差，則選擇體積超載。增加進(jìn)樣體積，峰高穩(wěn)定，峰形變寬，成平頭峰。但是選擇體積超載會(huì)存在樣品析出風(fēng)險(xiǎn)。

如何根據(jù)上樣量選擇Flash柱或者

根據(jù)已有Flash柱規(guī)格選擇上樣量

各位小伙伴如果無(wú)法直接判斷上樣量或選擇柱子規(guī)格，可以選擇月旭WelFlash中低壓制備色譜柱使用說明書中列出的Flash柱規(guī)格和樣品上樣量作為參考。