保護(hù)柱選擇和使用指南
更新時間:2022-08-15 點(diǎn)擊次數(shù):1517
相信小伙伴們都遇到這類情況,遇到基質(zhì)復(fù)雜,比如含油脂類的、蛋白類或者做中藥材項(xiàng)目,分析柱很容易出現(xiàn)柱壓升高、峰形變差、柱效下降等問題。直接更換分析柱的話成本太高,對色譜柱做異常維護(hù)也要花費(fèi)太多時間,那這種情況,可以加裝保護(hù)柱,來延緩色譜柱的使用壽命。
首先,過濾物理污染。HPLC色譜系統(tǒng)長期運(yùn)行在高壓狀態(tài),密封墊不可避免會產(chǎn)生細(xì)小的物理顆粒,對色譜柱進(jìn)口處造成永jiu堵塞。保護(hù)柱可以有效阻擋顆粒物對色譜柱的損傷;
其次,延緩化學(xué)污染。色譜柱對目標(biāo)物的分離,主要是化學(xué)力的相互作用。隨著目標(biāo)物的復(fù)雜程度不同,會對色譜柱有不同強(qiáng)度的吸附。強(qiáng)吸附在柱床上是由進(jìn)樣口處開始隨流動相方向緩慢延伸,加在色譜柱前端的保護(hù)柱采用和色譜柱*相同的填料且填裝優(yōu)良,強(qiáng)吸附首先發(fā)生在保護(hù)柱上,如果定期更換柱芯,色譜柱可以得到極大的保護(hù)。
保護(hù)柱的卡套中放置的是保護(hù)柱芯,柱芯內(nèi)含有填料。這些填料可以攔截樣品中的一些強(qiáng)極性、強(qiáng)酸性和強(qiáng)堿性物質(zhì),防止它們對色譜柱內(nèi)填料的污染和損壞。因此使用保護(hù)柱,可以對色譜柱進(jìn)行quan方位的保護(hù),是保護(hù)色譜柱最佳的方式。
首先,對于大多數(shù)分析工作者來說,一支1cm長的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用。但是,如果樣品非常不清潔,或工作中發(fā)現(xiàn)經(jīng)常要更換1cm的保護(hù)柱,那么就應(yīng)該選用2cm或3cm的保護(hù)柱;
其次,大多數(shù)人是根據(jù)色譜分析柱的填料來選擇保護(hù)柱的填料,正常情況下可以選擇與分析色譜柱一樣的色譜填料。
所以選擇保護(hù)柱的原則是:在滿足分離分析要求的前提條件下,盡可能的選擇較短的保護(hù)柱套,選擇與分析柱相同填料的柱芯。
保護(hù)柱也有使用壽命的,當(dāng)柱壓升高>10%,柱效下降>10%,以及分離度下降>10%,這些均是提醒我們要維護(hù)保護(hù)柱。
保護(hù)柱的維護(hù)方法是:在柱套上做好標(biāo)記,確認(rèn)保護(hù)柱芯的正反方向;取下保護(hù)柱,在不打開卡套的前提下將保護(hù)柱反接(注意此時不能接色譜柱),用甲醇:水=20:80以3mL/min流速沖洗10min,然后再用純甲醇以3mL/min流速沖洗10min。沖洗好后將保護(hù)柱正接,打開泵除去保護(hù)柱和連接管內(nèi)的空氣,再連接好色譜柱,可以正常使用;如果沒有改善,就需要更換保護(hù)柱芯了。
月旭科技目前有獨(dú)立式保護(hù)柱、直連式保護(hù)柱、直連式超高壓保護(hù)柱等,以及對應(yīng)的保護(hù)柱柱芯。產(chǎn)品信息如下:
直連式UHPLC保護(hù)柱柱芯貨號