玩轉(zhuǎn)免疫親和小柱
更新時(shí)間:2022-09-05 點(diǎn)擊次數(shù):903
霉菌毒素是由霉菌產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物,有較強(qiáng)的致癌性和降低免疫力作用。常見(jiàn)的霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素,嘔吐毒素、單端孢霉烯(T-2毒素)、玉米赤霉烯酮、串珠鐮刀菌素、伏馬菌毒素等。糧食及飼料很容易受到霉菌毒素的污染,這一問(wèn)題越來(lái)越成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可忽視的重大難題。
月旭科技利用其強(qiáng)大的科研力量和先進(jìn)的生產(chǎn)工藝開(kāi)發(fā)出了一系列霉菌毒素免疫親和柱產(chǎn)品,該系列產(chǎn)品通過(guò)了多次科學(xué)實(shí)驗(yàn)的檢驗(yàn),得到了多個(gè)guan方檢測(cè)機(jī)構(gòu)的認(rèn)證,并廣泛適用于各檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、進(jìn)出口機(jī)構(gòu)等。
一般一支完整的免疫親和柱由6部分組成:
• 柱管(1mL/3mL)
• 固定相(瓊脂糖凝膠)
• 抗體(瓊脂偶聯(lián)特異性抗體)
• 保護(hù)液(通常是緩沖溶液保持瓊脂潤(rùn)濕)
• 篩板以及上下頂蓋(防止柱液流失)
免疫親和柱技術(shù)即免疫親和層析技術(shù),屬于樣品前處理過(guò)程中一種簡(jiǎn)化樣品提取過(guò)程,有效提高樣品純度的凈化技術(shù),由于其特異性強(qiáng)在食品分析中屬于痕量檢測(cè),檢測(cè)限非常低。Welchom®免疫親和柱用于從樣品中分離、純化真菌毒素,基于抗原與抗體之間的特異性反應(yīng)。免疫親和柱中的抗體通過(guò)共價(jià)鍵作用懸浮在凝膠中,特異性吸附樣品中的真菌毒素。如果供檢測(cè)的樣品中含有真菌毒素,樣品通過(guò)免疫親和柱時(shí),毒素被抗體捕捉結(jié)合。所有其他物質(zhì),被從免疫親和柱中清洗出去。甲醇作為洗脫液,將真菌毒素將抗體上洗脫。
使用前先將親和柱恢復(fù)至室溫,放掉柱子的保護(hù)液,然后進(jìn)行上樣、淋洗、洗脫過(guò)程。
1)上柱的樣品溶液應(yīng)該保持酸堿中性、無(wú)懸浮物、甲醇濃度不宜過(guò)高;
2)樣品為復(fù)雜樣品時(shí)(如高蛋白、高油脂、酸性樣品),可將提取液分兩次提取樣品,提高提取效果;
3)樣品過(guò)柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻,約每秒1-2滴;
4)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)的最佳溫度是在25℃左右,實(shí)驗(yàn)需要的環(huán)境溫度最好是室溫24℃-28℃,太高或太低的溫度都會(huì)對(duì)親和柱的回收率有一定的影響。親和柱在使用前需要恢復(fù)至室溫再進(jìn)行實(shí)驗(yàn);
5)親和柱不要在無(wú)水狀態(tài)下,瓊脂容易干燥wei縮,影響親和柱的質(zhì)量;
6)親和柱儲(chǔ)存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫,因?yàn)榫彌_液凍結(jié),會(huì)嚴(yán)重影響親和柱內(nèi)的物理結(jié)構(gòu),對(duì)親和柱的質(zhì)量影響很大;
7)洗脫一般選擇試劑甲醇,為增強(qiáng)洗脫效果可加大甲醇體積;
8)樣液免疫親和柱凈化后,洗脫液過(guò)0.45μm或更小孔徑濾膜效果更好。